酶elisa試劑盒采用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速等特點(diǎn)。目前,它廣泛應(yīng)用于農(nóng)獸藥和真菌毒素殘留的檢測(cè)。大多數(shù)試劑盒加入樣品后反應(yīng)時(shí)間較短,環(huán)境溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響較大。因此,控制環(huán)境溫度是確保試劑盒測(cè)試結(jié)果有效性的重要因素。
實(shí)驗(yàn)室可采取以下措施控制溫度:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備溫濕度計(jì),并確保定期測(cè)量。根據(jù)天氣情況設(shè)置實(shí)驗(yàn)室空調(diào)的制冷或制熱功能,待室溫穩(wěn)定無干擾時(shí)開始檢測(cè)過程。應(yīng)選擇帶溫控裝置的培養(yǎng)儀器,如恒溫培養(yǎng)箱、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標(biāo)儀等,注意預(yù)熱應(yīng)提前啟動(dòng)。
酶elisa試劑盒在使用前須了解下面這些事項(xiàng):
1、每次實(shí)驗(yàn)預(yù)留一個(gè)孔作為空白調(diào)零孔,不添加任何試劑,后添加底物溶液和2n H2SO4。測(cè)量期間,使用此孔將外徑值調(diào)整為零。
2、手動(dòng)清洗盤子時(shí),每次添加清洗液。靜置5~30s,不得將一個(gè)酶標(biāo)l中的洗滌液濺入另一個(gè)酶標(biāo)孔,以防交叉污染。扔掉洗滌液后,將酶標(biāo)簽板放在毛巾或吸水紙上,輕輕拍干。
3、如果對(duì)樣品結(jié)果有疑問,應(yīng)使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
4、當(dāng)沒有去離子水或雙蒸餾水時(shí),可用娃哈哈純化水配制溶液。不要使用自來水。
5、使用微量取樣器時(shí),即使吸收了標(biāo)準(zhǔn)溶液,也應(yīng)在吸收不同瓶?jī)?nèi)的液體后更換槍頭。
6、不容易吸收液體太快,以免產(chǎn)生氣泡。ELISA試劑盒的吸收量不夠準(zhǔn)確。
7、吸液時(shí),選擇范圍接近所需量的微量取樣器,以減少誤差。
酶elisa試劑盒應(yīng)在均勻溫度下培養(yǎng),以防止蒸發(fā)和干燥。使用平板密封膜進(jìn)行培養(yǎng),并在黑暗中培養(yǎng)。當(dāng)同時(shí)測(cè)試多塊板材時(shí),應(yīng)將每塊板材平放,不得堆放,以避免溫度擴(kuò)散不均勻或邊緣效應(yīng)。
試劑盒恢復(fù)至室溫后,取出待使用的酶標(biāo)板孔。未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋中,加入干燥劑,密封嚴(yán)密,2℃-8℃冷藏。切勿將未*平衡到室溫的酶標(biāo)板放回鋁箔袋中,因?yàn)榇藭r(shí)由于溫差,酶標(biāo)板上會(huì)有水蒸氣,不利于穩(wěn)定儲(chǔ)存。